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一种新型的核酸污染去除方案

时间:2021-01-29 10:41 来源:润联环保 作者:admin 点击:

聚合酶链式反应(PCR)是体外扩增DNA序列的技术,目前在分子诊断领域中应用得非常广泛。该技术可将极微量的靶DNA特异的扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,PCR技术使微量的核酸(DNA或RNA)操作变得简单易行,同时还可使核酸研究脱离于活体生物。被广泛的应用于感染性病原体,如HBV、HCV包括新冠病毒病原体等的检测,PCR技术的发明是分子生物学的一项革命,极大地推动了分子生物学以及生物技术产业的发展,然而,pcr技术也存在一个弊端:pcr最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,操作复杂,所以在操作过程中常有污染发生,即使极少量的污染也会造成假阳性,稍有差错就会出现假阴性。

核糖核酸酶污染

核糖核酸酶(RNase)污染在RNA实验中是十分常见的,对实验结果的影响也很明显。因为RNase无处不在,且耐高温,所以想要完全排除RNase的影响并不是一件容易的事情,通常需要操作者对所有实验器具的选择小心再小心,操作谨慎又谨慎。一旦引入核酸酶的污染导致样本降解,所有的操作流程就又要从提取开始,非常麻烦。

核酸污染

除了RNase,还有PCR产物造成的气溶胶污染。由于PCR能在短时间内让靶核酸增加几百万倍,大量的PCR产物如果进入到实验室空气中也容易造成核酸污染。即使是极其微量的PCR产物也可以造成假阳性结果,导致实验结果无法正确判断,这也是分子诊断领域亟需解决的问题。

为了避免上述污染,很多实验室会进行分区管理,并且要求实验者的操作步骤要尽可能的严谨,同时还有一些实验室会选择使用一些清除剂、消毒剂来进行预防或清除。虽然使用消毒剂操作起来很方便,但是在体验感和安全性方面着实有点让人望而却步。所以相比于常用的刺鼻消毒液或易燃的75%乙醇,一款清除实验室污染的“必备利器”:RNA酶NW-NR核酸污染去除剂+欧菲姆OXY-30000干雾灭菌器,安全无毒、没有刺激性气味,可以轻松去除实验室中的核酸酶和核酸污染,减少重复实验次数,让高效工作成为常态。

欧洲ic公司独家研发的NW-NR核酸污染去除剂(深圳市润联环保科技有限公司独家代理)是一种非碱性、无腐蚀、无致癌性的核酸(包括DNA、RNA)清除溶液。该产品可断裂双链DNA并将其完全降解,而且已降解的核酸片段不能被恢复,从而彻底消除PCR过程中由于环境污染而导致的非目标DNA的假阳性扩增,它可以使用在实验室的所有地方。NW-NR核酸污染去除剂采用液体:NW-NR核酸去除剂,主要成分包含高纯度过氧化氢,及活性银离子组成,双重功效,即能满足实验室灭菌需求,同时银离子的摄入阻阻碍遗传信息的复制,干扰核酸的形成,包括DNARNA的合成。会对实验室各种仪器表面产生腐蚀性,不会对塑料、橡胶等仪器的表面产生任何损伤。

NW-NR核酸污染去除剂配合设备:欧菲姆OXY-30000干雾灭菌器,渗透性好,无孔不入高效解决核酸污染。特点:雾化颗粒极小,肉眼不可见,可同时将核酸去除液扩散到各个角落,包括物体表面,和空间,无盲点。该方案主要考虑到目前实验室核酸污染的途径有很多,市面上单一的核酸去除剂大多数采用喷雾模式的包装,在人工操作下,处理存在盲点,或者说需要很多次处理,浪费了大量的人力而且效果不明显,因此,实验室核酸去除必须是高扩散性设备与核酸去除剂的组合才能保证达到预期效果。

方案实施过程:1确定实验室体积,以100立方米为例。

2确定单位使用量,已经出现污染核酸去除剂参考用量5ML/立方,每次实验完后整体消毒用量参考用量3ML/立方。

3确定时间:对已确定污染的实验室,100立方米为例,参考用量500ml.设备雾化扩散时间30分钟,密闭时间2小时,排风时间30分钟。预防核酸污染的参考用量300ml.设备扩散时间20分钟,密闭30分钟,排风20分钟,按实验任务安排。

4效果确认采用欧菲姆OXY-30000和诺福核酸去除剂对扩增及产物分析一区处理后,对该区域的操作台面、荧光定量基因扩增仪扩增仓、空气等环境监测点连续3天SARS-CoV-2核酸监测,连续3天检测SARS-CoV-2核酸阴性,判定为污染源清除成功,实验室可正常使用运行。

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